1874年、小室翠雲は現在の群馬県館林市に生まれました(当時は栃木県邑楽郡舘林町)。
1889年、15歳のときに故郷を出て、日本南画の代表的な画家のひとりであった田崎草雲に師事。師が死去する1899年までその門下にあって腕を磨き、日本美術協会の展覧会に積極的に作品を発表し、高い評価を得ます。草雲の死後は同世代の画家たちと切磋琢磨し、荒木十畝や高島北海といった画家たちとともに正派同志会を結成(1907年)。またこの頃から文展に作品を発表して高評価を獲得。第9回からは審査員を務めつつ出品して、新進気鋭の日本画家として活躍します。

こうして、日本国内における南画の代表的な画家のひとりとなった翠雲。1904年のセントルイス万国博覧会で作品が好評を得ていたこともあり、海外にもその目を向けるようになります。 1930年には、ドイツで開催された日本画展に代表として赴き、好評を博しました。 以後も数々の展覧会で活躍し、個展を開くなどしてその名をいよいよ高め、日本画壇の重鎮として存在感を発揮します。1945年にその生涯を閉じることになりましたが、最晩年に至ってもその筆は衰えることなく、文展などに作品を発表し続け、現役であり続けました。